尼康显微镜使用全指南

更新时间：2025-08-06 点击次数：1948

尼康显微镜

　　尼康(Nikon)显微镜以精密光学设计、模块化扩展性及智能软件集成著称，广泛应用于生命科学、材料分析、工业检测等领域。以下从核心系统、操作流程、智能功能到维护规范展开详解，覆盖主流型号。

　　一、核心系统构成与原理

　　1. 光学系统：尼康核心技术壁垒

　　无限远校正光学系统(CFI)

　　所有物镜、镜筒、目镜采用平行光路设计，消除像差，确保从中心到边缘的均匀分辨力。

　　典型配置：

　　物镜：Plan Fluor(高透光率荧光)、APO CHROMAT(复消色差，用于多色成像)、WD 50mm长工作距离物镜(工业检测)。

　　目镜：高眼点型(支持戴眼镜用户，视野直径22mm)。

　　多模式照明技术

照明类型	适用场景	关键配件
透射光柯勒照明	病理切片、细胞观察	卤素灯12V/100W + 绿色滤光片
落射荧光	GFP/RFP标记样品	汞灯/LED光源+多波段滤光块
微分干涉相衬	活细胞无染色观察	沃拉斯顿棱镜+偏振器
暗场	纳米颗粒、表面缺陷检测	环形遮光器+抛物面聚光

　　2. 机械系统：精准稳定的基石

　　载物台：

　　右手低手位载物台：8mm调焦行程，适合教学。

　　电动XYZ载物台：行程200×200mm，重复定位精度0.1μm。

　　调焦机构：

　　粗微同轴旋钮(每圈100μm微调)，带限位锁防止物镜碰撞。

　　电动Z轴：纳米级步进，支持3D层扫。

　　3. 数字化扩展模块

　　相机端口：C接口(标准)、FN接口(零像差中继)。

　　智能配件：

　　DS-Fi3相机：2000万像素CMOS，动态范围78dB。

　　NIS-Elements软件：驱动硬件联控，支持多维实验设计。

　　二、标准化操作流程(以生物显微镜Eclipse E100为例)

　　第一步：光路初始化

　　1.打开电源，调节亮度旋钮至50%。

　　2.旋转物镜转盘至10×物镜(避免高倍镜接触样品)。

　　3.置样本于载物台，夹持固定。

　　第二步：柯勒照明校准(关键！)

　　关闭现场光阑-调节聚光镜高度至像清晰-开大孔径光阑至80%-微调聚光镜中心螺丝使光斑居中-打开现场光阑至刚好覆盖视野

　　注：此步骤确保无杂散光干扰，提升对比度30%以上。

　　第三步：对焦与观察

　　1.粗调旋钮抬升载物台至接近样品。

　　2.从目镜观察，缓慢降载物台至出现图像(防碰撞！)。

　　3.切换40×物镜，用微调旋钮精焦(细胞核纹理清晰为基准)。

　　第四步：油镜使用规范

　　1.在40×物镜下找到目标区域。

　　2.转开物镜，在玻片滴浸油1滴(折射率n=1.518)。

　　3.切换100×油镜，轻旋微调至接触浸油(禁止粗调！)。

　　4.观察后立即用二甲苯棉签擦拭油镜头。

　　三、智能高阶功能实战

　　1. 多维实验自动化

　　时间序列拍摄：设置间隔30秒拍摄，持续24小时(活细胞分裂研究)。

　　Z轴层扫：步进1μm，扫描20层(3D肿瘤球模型重建)。

　　2. 高级图像分析

　　颗粒计数：识别直径>2μm的细胞器(置信度>95%)。

　　荧光共定位分析：计算Manders系数验证蛋白相互作用。

　　四、关键维护与故障排除

　　1. 日常维护表

部件	周期	操作规范
光学表面	每次使用后	用压缩气吹尘，镜纸蘸乙醇单向擦拭
机械导轨	每月	涂超薄润滑油（型号：NT-1000）
汞灯寿命	200小时	重置计时器，避免爆炸性熄灭